Prepubertal Sýçan Testis Dokusunun Ýncelenmesinde Parafin, Epon Yarý Ýnce ve Ýnce Kesitlerin Saðladýðý Bilgilerin Karþýlaþtýrýlmasý

Prepubertal testis dokusunun fertilite restorasyon için kullanýmýnda, ýþýk mikroskobik incelemelerinin nasýl daha iyi görünür hale getirilebileceðini kendi deneyimlerimizi de ekleyerek irdelemek istedik.
Kanser tedavisi görecek erkek çocuklarýn ilerde kendi hücreleri ile nesillerinin devam etmesi için testis dokularý üzerinde araþtýrmalar sürdürülmektedir. Prepubertal testis dokularý dondurularak ileride kullanýlmak üzere saklanmaktadýr. Günümüzde yapýlmakta olan in vitro çalýþmalarla bu dokularýn nasýl kullanýlacaðý belirlenmeye çalýþýlmaktadýr. Ýlerleyen çalýþmalar prepubertal testis doku elemanlarýnýn etkin þekilde incelenmesini gerekli kýlmaktadýr.
Prepubertal testis dokusu, seminifer tubuluslarda, intratubuler Sertoli hücreleri, az sayýda gonositler/ spermatogonyal kök hücreler, interstisyel alanda ise miyoid hücreler ve leydig hücrelerini içermektedir. Bu testislerde, kök hücreler dýþýnda eriþkindeki gibi germinal seri hücreleri bulunmamaktadýr. Ayrýca eriþkin testis dokusuna göre hücrelerin bulunduðu alanlar da farklýlýklar göstermektedir. Sertoli hücreleri daðýnýk yerleþimlidir. Sertoli hücreleri arasýnda sýký baðlantý kompleksleri ve kan-testis bariyeri henüz oluþmamýþtýr. Gonositler henüz bazal membrana yerleþmemiþ lümen bölgesinde ya da bazala doðru göç eder durumdadýr. Özellikle Sertoli hücreleri ile gonositleri/spermatogonyumlarý ýþýk mikroskobi incelemeler ile birbirinden ayýrt edebilmek zorluk göstermektedir. Yapýlan uygulamalarýn sonuçlarýný deðerlendirmek için bu dokularýn ýþýk mikroskobunda hücrelerin tanýnabilir preparatlarýnýn hazýrlanmasý gereklidir.
Rutin doku takibiyle hazýrlanan parafin kesitleri, özellikle intratubuler hücrelerin incelenmesi ve ayýrt edilmesinde yetersiz kalmaktadýr.
Prepubertal testis dokularý için epon bloklardan hazýrlanan yarý ince kesitler, parafin kesitlere oranla intratubuler hücrelerin birbirinden ayýrt edilmesinde ve morfolojilerinin belirlenmesinde daha uygun görülmektedir.
Elektron mikroskop doku takibi özel iþlem gerektirmesi nedeniyle elektron mikroskobu bulunan merkezlerde uygulanabilmektedir.

A Comparison of the Information Provided by Paraffin, Epon Semi-Thin and Thin Sections on the Examination of Prepubertal Rat Testicular Tissue

The aim of this study is to examine how light microscopic examinations can be made better visible in the use of prepubertal testicular tissue in fertility restoration by adding our own experiences.
Researches go on testicular tissues to ensure that boys who will receive cancer treatment continue to have their own generations in the future. Prepubertal testicular tissues are frozen and stored for later use. In vitro studies continue for the use of these tissues. Therefore, further researches necessitate for the effective determination of prepubertal testicular tissue elements.
Prepubertal testis tissue contains Sertoli cells and few gonocytes / spermatogoniums in seminiferous tubules, myoid and leydig cells in the interstitial area. Prepubertal testes, there aren’t germinal serial cells other than stem cells as in adults. The areas where the cells are located different from the adult testicular tissue. Sertoli cells are dispersed. Tight junction complexes and blood-testis barrier have not yet formed.
Gonocytes aren’t yet settled in the basement membrane or just migrating towards the base. Especially, it can be difficult to distinguish between Sertoli cells and gonocytes / spermatogoniums by light microscopy examinations. In order to evaluate the results of the applications, it is necessary to prepare the recognizable preparations of these tissues under the light microscope.
Paraffin sections prepared are insufficient in examining and distinguishing especially intratubular cells.
Semi-thin sections from epon blocks are more appropriate than paraffin sections for these morphology definitions.
Electron microscopy can be performed in centers with electron microscope because tissue monitoring requires special application.